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分析流程

Bulk RNA-seq 标准差异表达分析增强版

面向 bulk RNA-seq 项目的标准差异表达增强流程,覆盖实验设计、FASTQ 质控、STAR/Salmon 定量、DESeq2 统计建模、可视化、富集分析与结果交付。

RNA-Seq转录组基础与表达变化
分析流程

时间序列 RNA-seq 分析

面向多时间点 bulk RNA-seq 的动态表达分析流程,覆盖实验设计、DESeq2 LRT、maSigPro/ImpulseDE2、表达模式聚类、时间趋势可视化和功能解释。

RNA-Seq转录组基础与表达变化
分析流程

多组学联合分析:RNA-seq + ATAC-seq/CUT&Tag

整合 RNA-seq 差异表达、ATAC-seq 开放染色质和 CUT&Tag 组蛋白修饰/转录因子结合信号,解释基因表达变化背后的调控机制。

Multi-omics机制解释与多组学调控
分析流程

肿瘤 RNA-seq 综合分析

面向肿瘤 bulk RNA-seq 的综合分析流程,整合 DEG、通路活性、免疫浸润、分型、预后、融合基因和候选机制解释。

Cancer Transcriptomics肿瘤转录组与临床应用
分析流程

RNA-seq Salmon + tximport + DESeq2

基于 Salmon 转录本准比对定量、tximport 基因层汇总和 DESeq2 差异表达分析的快速 RNA-seq 流程。

RNA-Seq转录组基础与表达变化
分析流程

RNA-seq STAR + featureCounts + DESeq2 + TPM

基于 STAR 基因组比对、featureCounts 基因计数、DESeq2 差异表达和 TPM/标准化计数整理的 RNA-seq 流程。

RNA-Seq转录组基础与表达变化
文献

STAR: ultrafast universal RNA-seq aligner

Bioinformatics · 2013

Bioinformatics2013
分析流程

可变剪接分析 rMATS/SUPPA2

面向 bulk RNA-seq 的可变剪接增强流程,覆盖实验设计、剪接事件类型、STAR 比对、rMATS 事件检测、SUPPA2 PSI/dPSI 分析、可视化和候选事件解释。

RNA-Seq转录组结构与网络
分析流程

WGCNA 共表达网络分析

面向 bulk RNA-seq 表达矩阵的 WGCNA 共表达网络流程,覆盖表达矩阵预处理、软阈值选择、模块识别、模块-性状相关、hub gene 挖掘、富集分析与可视化解释。

RNA-Seq转录组结构与网络
分析流程

lncRNA/circRNA/miRNA 非编码 RNA 分析

整合 lncRNA、circRNA 和 miRNA 的非编码 RNA 分析流程,覆盖数据类型判断、表达定量、差异分析、靶基因预测、ceRNA 网络和可视化解释。

RNA-Seq转录组基础与表达变化
分析流程

单细胞高级下游:拟时序、通讯、RNA velocity

面向 scRNA-seq 的高级下游分析流程,覆盖拟时序轨迹、细胞通讯、RNA velocity、起点选择、结果交叉验证和生物学解释。

scRNA-Seq单细胞与空间组学
分析流程

RNA editing 分析:A-to-I editing

面向神经、肿瘤和免疫 RNA-seq 的 A-to-I RNA editing 分析流程,覆盖 DNA/RNA 区分、REDItools/GIREMI、位点过滤、SnpEff/ANNOVAR 注释和功能解释。

RNA-Seq转录组结构与网络
分析流程

10x 单细胞基础降维聚类

面向 10x Genomics scRNA-seq 数据的综合分析流程,覆盖分析类型选择、Cell Ranger 预处理、Seurat v5/Scanpy 质控、整合、聚类、注释和下游解释。

scRNA-Seq单细胞与空间组学
软件与算法

STAR

高性能 RNA-seq splice-aware 比对器,适合 bulk RNA-seq、融合基因检测和剪接分析。

比对与索引命令行软件
软件与算法

HISAT2

轻量级 splice-aware RNA-seq 比对器,适合资源受限环境下的大规模样本处理。

比对与索引命令行软件
数据库

GEO

NCBI 功能基因组数据仓库,收录 RNA-seq、芯片、甲基化、ChIP-seq 等项目。

转录组表达ExpressionPublic Data
数据库

ArrayExpress

EMBL-EBI 表达实验归档库,包含芯片和测序表达项目。

转录组表达ExpressionArchive
数据库

Human Cell Atlas

人类细胞图谱数据入口,适合寻找组织级单细胞参考数据和细胞类型图谱。

单细胞与空间组学Single-cellAtlas
数据库

CELLxGENE

交互式单细胞数据浏览和下载平台,适合查看公开 h5ad 数据和细胞注释。

单细胞与空间组学Single-cellVisualization
数据库

Single Cell Portal

Broad Institute 单细胞研究数据平台,适合查找研究项目、marker 和可视化结果。

单细胞与空间组学Single-cellVisualization
数据库

10x Datasets

10x 官方示例数据集合,适合学习 Cell Ranger、Seurat、Scanpy 和 Visium 流程。

单细胞与空间组学Tutorial DataDownload
数据库

GDC / TCGA

NCI 癌症组学数据门户,整合 TCGA 等项目的表达、突变、CNV 和临床数据。

肿瘤组学CancerTCGA
分析流程

转录因子调控网络分析

从 RNA-seq、WGCNA 或单细胞结果中推断关键转录因子和 TF-target 网络,整合 DoRothEA/VIPER、ChEA3、TRRUST、motif 和表达相关性证据。

Regulatory Network机制解释与多组学调控
分析流程

免疫浸润分析 CIBERSORT/xCell/ESTIMATE

基于 bulk RNA-seq 表达矩阵估计免疫细胞浸润和肿瘤微环境状态,覆盖 CIBERSORT/xCell/MCP-counter/ESTIMATE 多方法比较和可视化解释。

Immunogenomics机制解释与多组学调控
分析流程

融合基因检测 STAR-Fusion/Arriba

面向肿瘤 RNA-seq 的融合基因检测流程,覆盖项目目录、示例 FASTQ、STAR-Fusion、Arriba、junction/spanning reads 解读、过滤和可视化。

Cancer Transcriptomics肿瘤转录组与临床应用
软件与算法

Salmon

无需传统比对的转录本定量工具,常与 tximport 和 DESeq2 构成快速 RNA-seq 流程。

表达定量命令行软件
软件与算法

DESeq2

基于负二项分布的 RNA-seq 差异表达分析 R 包,适合有生物学重复的 bulk RNA-seq。

差异表达分析R 包
软件与算法

edgeR

适合复杂设计和小样本 RNA-seq 的差异表达 R 包,提供 TMM 标准化和 GLM 框架。

差异表达分析R 包
软件与算法

limma-voom

将 RNA-seq counts 转换为带权重的线性模型分析,适合复杂设计和大队列。

差异表达分析R 包
数据库教程

从 SRR 编号下载 FASTQ

复现论文测序数据,或把公开 reads 接入自己的 RNA-seq / WGS 流程。

SRA教程
数据库教程

下载 TCGA 表达矩阵

做肿瘤差异表达、生存分析或免疫浸润分析前,获取 TCGA RNA-seq 数据。

GDC / TCGA教程
文献

Massively parallel digital transcriptional profiling of single cells

Nature Communications · 2017

Nature Communications2017
分析流程

空间转录组 Visium 分析

面向 10x Genomics Visium 空间转录组的分析流程,覆盖 Space Ranger、组织切片 QC、空间聚类、空间差异表达、细胞类型解卷积和空间通讯解释。

Spatial Transcriptomics单细胞与空间组学
分析流程

Ribo-seq 翻译组分析

面向 ribosome profiling 的翻译组分析流程,覆盖 RPF 质控、rRNA/tRNA 去除、比对、P-site 校正、三核苷酸周期性、ORF 检测和翻译效率分析。

Translatomics长读长、翻译组与非模式物种
软件与算法

featureCounts

从 BAM 文件生成 gene count matrix 的经典工具,适合 STAR/HISAT2 后接差异分析。

表达定量命令行软件
软件与算法

Seurat v5

R 生态中主流的单细胞分析框架,覆盖质控、整合、降维、聚类和注释。

单细胞分析R 包
软件与算法

Scanpy

Python 生态的单细胞分析框架,适合大规模 AnnData 数据处理和可复现脚本化分析。

单细胞分析Python 包
软件与算法

Harmony

常用单细胞批次校正算法,在 PCA 空间中整合多样本并保留主要生物差异。

单细胞分析R 包
软件与算法

CellChat

基于配体-受体数据库推断细胞通讯网络,适合肿瘤微环境和免疫互作分析。

单细胞分析R 包
数据库教程

下载参考基因组与 GTF

构建 STAR/HISAT2 索引或做 featureCounts 计数前,先统一 genome FASTA 与 GTF 注释版本。

Ensembl教程
数据库教程

从 GEO 追踪到 SRA 原始数据

当 GEO 只提供样本信息时,需要跳转 SRA 下载 FASTQ 重新分析。

GEO教程